在线观看无码的免费网站丨夫妇交换性三中文字幕丨无码人妻精品一区二区蜜桃网站丨日韩亚洲精品国产第二页丨精品少妇ay一区二区三区

免疫組化ABC法

（一）、儀器設備
   1）18cm不銹鋼高壓鍋或電爐或醫用微波爐；
    2）水浴鍋

（二）、試劑 
    1）PBS緩沖液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。
    2）0.01mol/L檸檬酸鹽緩沖液（CB，pH6.0，1000ml）：檸檬酸三鈉 3g，檸檬酸 0.4g。
    3）0.5mol/L EDTA緩沖液（pH8.0）：700ml水中溶解186.1gEDTA·2H2O，用10 mmol/L NaOH調至pH8.0,加水至1000ml。
    4）1mol/L的TBS緩沖液（pH8.0）：在800ml水中溶解121gTris堿，用1N的HCl調至pH8.0,加水至1000ml。
    5）酶消化液： a、0.1%胰蛋白酶液：用0.1%CaCl2(pH7.8) 配制。 b、0.4%胃蛋白酶液：用0.1N的HCl配制。
    6）3%甲醇-H2O2溶液：用30%H2O2和80%甲醇溶液配制。
    7）封裱劑：
    a、甘油和0.5mmol/L碳酸鹽緩沖液（pH9.0～9.5）等量混合；
    b、甘油和TBS(或PBS)配制。 
    8）TBS/PBS pH9.0～9.5，適用于熒光顯微鏡標本；pH7.0～7.4適合于光學顯微鏡標本。

（三）、   
    SABC法
    1)脫蠟、水化。
    2)PBS洗兩次各5分鐘。
    3)用蒸餾水或PBS配置新鮮的3%H2O2，室溫封閉5～10分鐘，蒸餾水洗3次。
    4)抗原修復。
    5)PBS洗5分鐘。
    6)滴加正常山羊血清封閉液，室溫20分鐘。甩去多余液體。
    7)滴加抗小鼠一抗（合適的濃度）,室溫1小時或者4℃過夜或者37℃1小時 

  （4℃過夜后在37℃復溫45分鐘）。
    8)PBS洗三次每次2分鐘。
    9)滴加生物素化二抗,20℃～37℃20分鐘。
    10)PBC洗3次每次2分鐘。
    11)滴加試劑SABC，20℃～37℃20分鐘。
    12)PBS洗4次每次5分鐘。
    13)DAB顯色：DAB顯色試劑盒或者自配顯色劑顯色（鏡下掌握顯色程度）。
    14)蒸餾水洗。蘇木素復染2分鐘、鹽酸酒精分化。
    15)脫水、透明、封片、鏡檢。

實驗代做服務：